作用于pNPP的磷酸酶在凝胶中的特异性染色

本方法能在聚丙烯酞胺凝胶中快速,简便,灵敏和特异地染能以对硝基苯磷酸盐（pNPP）为底物的磷酸酶．它是根据Goren等人在凝胶中特异性染色环核苷酸磷酸二酯酶的方法[1]改进而成．这是基于pNPP被对硝基苯磷酸酶（pNPPase）作用后释放出的Pi在凝胶中结合铅离子形成磷酸铅,沉淀在胶中形成白色区带,再用硫化铰处理凝胶,将磷酸铅转变为硫化铅,从而使白色区带转变为棕黑色区带．它可同时分析和比较不同动物或细胞以及用不同药物处理的同一来源的动物或细胞的细胞粗提物中pNPPase的生化性质,还可在纯化此类酶的过程中,提前测定在粗提…     

红细胞分化因子诱导HL-60细胞排核过程中酪氨酸蛋白质磷酸化的改变

红细胞分化因子是从兔子网织红细胞中提出的一个蛋白因子,它可以使多种癌细胞株的生长受到抑制[1]．以早幼粒白血病细胞（HL-60）为材料,研究其被EDDF诱导过程中细胞内PTK,PTPP及它们底物磷酸化水平的变化．实验发现：部分纯化的EDDF对HL-60细胞生长有明显的抑制作用,经NBT还原和Giemsa染色,可见HL-60细胞被诱导出现排核．同时,细胞的PTK,PTPP酶活性有明显的变化,PTPP和PTK的底物蛋白在胞浆中酪氨酸蛋白磷酸化水平亦出现改变（但颗粒部分变化不明显）．     

表达黄瓜花叶病毒外壳蛋白的转基因番茄抗黄瓜花叶病毒侵染

通过土壤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导将黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV CP)的cDNA成功地引入番茄(Lycopersicon esculentum)植株中,并得到转基因植株。用强致病力CMV株系接种后,表达CMV外壳蛋白的转基因植株表现出对CMV侵染的抗性。转基因植株RI代的抗性基因以接近3:1比例分离。对R_1代接种CMV后,表达CMV CP的植株病症减轻,发病率、病情指数及病毒积累量明显低于对照。病症出现推迟1个多月。     

培养介质pH和EGTA对水霉(Saprolegnia ferax)菌丝细胞肌动蛋白的分布与结构的影响

菌丝在pH 5.0—8.0介质中维持顶端生长,Rhodamin-phalloidin荧光探针显示在菌丝顶端都存在F-actin的“帽子”结构;加入EGTA到培养介质中不影响菌丝的顶端生长和actin的“帽子”结构。值得注意的是:菌丝的Rhodamin-phalloidin荧光强度大小与菌丝顶端生长速率成正比;在含有或不含有EGTA的pH5.0培养条件下,菌丝的生长速率均很低,且后部颗粒状的荧光斑点消失;在pH 3.0-4.0培养介质中菌丝生长停止,不但F-actin“帽子”结构消失,整个菌丝荧光也变得非常微弱无法观察,提示酸性pH可引起F-actin的解聚,从而导致生长速率下降甚至生长停止。     

高等真核细胞蛋白质磷酸化与细胞周期G1向S期过渡的调控

真核生物细胞周期运行涉及三个时期过渡(Phase transitions)的调控;1.G_0向G_1期过渡,2.G_1向S期过渡,3.G_2向M期过渡等的调控。近年来,对调控G_1向S期过渡的生化事件的研究结果表明,转录和转录后水平上的调控机制在其中起重要作用。通过磷酸化与去磷酸化而参与G_1向S期过渡调节的蛋白主要有:pRB(retinoblastoma gene product,视网膜母细胞瘤基因蛋白),p107(pRB related pro-tein,pRB相关蛋白),p53,RPA(replicati一     

菊头蝠耳长与叫声频率的相关性

小蝙蝠亚目 (Ｍｉｃｒｏｃｈｉｒｏｐｔｅｒａ)的蝙蝠利用高频声学信号定向并感知周围环境 ,很多种类还利用回声定位探测和捕捉猎物。生境的不同使蝙蝠进化出多种捕食策略 ,并形成相应多样的回声定位叫声类型 (Ｆｅｎｔｏｎ ,1982 ;Ｎｅｕｗｅｉｌｅｒ,1989;张树义等1999ａ) ,其基本类型有两种 :调频 (Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙｍｏｄｕｌａｔｅｄ ,ＦＭ )叫声和恒频 (Ｃｏｎｓｔａｎｔｆｒｅｑｕｅｎｃｙ ,ＣＦ)叫声 (Ｍｅｔｚｎｅｒ ,1991;张树义等 ,1999ｂ)。旧大陆热带的菊头蝠科 (Ｒｈｉｎｏｌｏｐｈｉｄａｅ)和蹄蝠科(Ｈｉｐｐｏｓｉｄｅｒ…     

光照对水生动物行为的影响

水生动物的行为受外界环境因素的影响很大,光作为自然界中重要的生态因子,对动物行为的影响极为明显。对于光照的变化,动物能调节自身作出适当的行为反应。本文主要对国外这方面的研究报道作了总结。１光照对水生动物趋光行为的影响动物的趋光性与其视力有关,因而在不...     

血清性激素在白腰文鸟前脑发声控制核团神经元早期性双态分化中的作用

本文究了雌、雄白腰文鸟(Lonchura striata swinhoei)不同发育时期前脑四个控制发声重要核团古纹状体栎核(RA)、新纹状体前部巨细胞核外侧部(LMAN)、X区(Area X)和高级发声中枢(HVC)中神经元数量、体积和体内雌二醇(E2)和睾酮(T)浓度的变化,以揭示性激素对鸣禽发声核团性双态性分化的影响。结果发现：(1)HVC、LMAN和X区在发育早期神经元数量和体积均呈显著性双态性差异,而RA神经元直至30日龄(P30)后才显示出明显性别差异(P＜0．05);(2)除RA外,HVC、LMAN和X区神经元体积的显著性双态性差异均发生在P20左右,P20后雌、雄核团内的神经元体积仅有较小范围的波动;(3)RA和LMAN神经元数量随年龄增长而逐渐减少;雌、雄鸟HVC和雄鸟X区的神经元数量在P20—30间均增长,雄鸟HVC的增长幅度显著大于雌鸟。P30后HVC和X区的神经元数量不再增加,开始小幅度减少;(4)四个发声核团的神经元数量和体积在P5-120期间均出现1—2个急剧变化期,此变化期与体内雌激素水平开始出现显著性差异的临界期及核团间神经联系开始建立的时期相对应;(5)雌、雄鸟血清中E2的水平在核团发育初期(P5)差异显著,雌鸟为雄鸟的7．45倍,P5后则呈相反方向变化趋势,在P15时雄鸟中的E2水平反超过雌鸟,差异显著(P＜0．05)。睾酮仅在发育P50后的雄鸟体内被检测出,雌鸟中始终未能检测出T的存在。结果提示：雌、雄白腰文鸟发育早期体内E2浓度的变化启动了HVC、LMAN和X区早期神经元性双态性的分化和持续发育;睾酮对雌、雄鸣禽发声控制核团中早期神经元的性双态性分化作用较小[动物学报49(3)：353—361,2003]。     

衣藻叶绿体分裂相关基因CrFtsZ3的克隆及其原核表达

FtsZ蛋白在原核细胞以及植物细胞叶绿体的分裂过程中发挥着重要作用。为了研究叶绿体分裂装置的进化 ,运用RT PCR方法从莱茵衣藻中克隆了叶绿体分裂相关基因CrFtsZ3。由于已经从衣藻细胞中克隆了一个ftsZ基因 ,所以CrFtsZ3的克隆表明衣藻中已经存在两类不同的 ftsZ基因 ,这说明 ftsZ基因的复制与分歧发生于绿藻的分化之前。序列分析结果显示 ,CrFtsZ3所编码的蛋白质具有FtsZ蛋白的典型模体。进一步的原核表达与定位分析表明CrFtsZ3 GFP融合蛋白沿着宿主菌体的纵轴方向有规律地聚集成荧光点或荧光带 ,并且CrFtsZ3蛋白过量表达明显干挠了宿主菌正常的细胞分裂过程 ,说明衣藻CrFtsZ3蛋白能够识别宿主细胞内的分裂位点并影响细胞分裂过程 ,从而初步验证了它的生物学功能     

白腰文鸟发声相关核团体积在发育中的变化及神经机制

首先研究了5-120日龄雌雄白腰文鸟（Lonchura striata swinhoei)4个主要发声核团（RA,LMAN,AreaX和HVC）的体积变化,再通过神经示踪技术研究这些核团与其他核团神经联系的建立时间,以了解发声核团发育及性别分化的神经机制,结果表明：（1）雌雄RA体积均在20,30日龄前后表现出急剧的变化和雌雄差异;雌雄RA在15和25日龄分别接受LMAN和HVC的神经支配,（2）雌雄LMAN体积分别在20,30日龄前先增长,之后均缩小,雌雄LMAN的神经元大小均在15和20日龄间急剧增长,但在该时段之后,不再发生明显变化,雌雄LMAN均在15日龄接受RA的神经支配。（3）AreaX核体积,神经元大小最明显的变化位于20-25日龄间;雌雄AreaX核均在15日龄时接受HVC的神经支配,（4）AreaX核体积,神经元大小最明显的变化位于20-25日龄间;雌雄AreaX核均在15日龄时接受HVC的神经支配,（4）雌雄HVC体积变化的最大值在20和30日龄前后,雄乌HVC的神经元大小在20,30日龄前后,雌鸟在15-20日龄发生较大的变化,其余组间变化小或不明显,雌雄HVC分别在15,25日龄同AreaX核,RA建立神经联系,因此,4个发声核团组织学的明显变化与核团间神经联系的建立相关,说明发声核团间的神经联系可能影响和决定了核团体积在发育中的变化。